9 просмотров
Рейтинг статьи
1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд
Загрузка...

Содержание

Гемотест квантифероновый тест

Как делают Квантифероновый тест на туберкулез

Квантифероновый тест – лабораторная методика, применяемая наряду с пробой Манту и диаскинтестом в диагностике туберкулеза. Тест выявляет не сами микобактерии, а количество гамма-интерферона в крови пациента, вырабатываемого клетками иммунной системы на МБТ.

Показания к назначению

Обязательных показаний для прохождения данного теста нет, т. к. в России он является дополнительным методом диагностики. Но в ряде случаев врачи рекомендуют сдать анализ, например для выявление скрытого течения патологии у ВИЧ-инфицированных, диабетиков, онкобольных, тех, кто принимает иммуносупрессоры и др.

Сдача квантиферонового теста на туберкулез поможет диагностировать заболевание при получении положительного результата Манту или диаскинтеста, вызывающего сомнения (так бывает при аллергии на кожные пробы).

Данная методика подходит тем, кому противопоказаны туберкулиновые пробы, а также тем, кто недавно контактировал с больными, поэтому рискует заболеть туберкулезом.

К таким обследуемым относятся сотрудники противотуберкулезных медучреждений, люди, прибывшие из мест лишения свободы, нарко- и алкоголезависимые.

Результаты данного обследования обязательны для лиц, подавших заявление на получение визы в США.

Противопоказания

Любой человек может пройти данный тест, т. к. он не имеет противопоказаний.

Преимущества и недостатки метода

У данной методики много плюсов:

  1. Специфичность на высоком уровне. Благодаря этому для пациентов, когда-то привитых БЦЖ-вакциной, не будет получен ложноположительный результат обследования. Это же относится и к людям, у которых наблюдается аллергия на компоненты пробы Манту.
  2. Возможность проводить обследование пациентов, состояние здоровья которых не позволяет прибегнуть к кожным пробам. Тест могут пройти дети и взрослые.
  3. Отсутствие побочных действий. Методика тестирования не предполагает введения каких-либо веществ в организм человека. Все исследования проводятся в пробирке над кровью, забранной у пациента.
  4. Объективная оценка. Тест показывает уровень гамма-интерферона в крови, а Манту и диаскинтест оценивают размер папулы, куда был введен препарат. Результат кожных проб зависит от медицинского сотрудника, поэтому субъективен.
  5. Возможность пройти тестирование в любое время. Для квантиферонового исследования нет ограничений по наличию заболеваний, в т. ч. хронических, или по времени, которое прошло после вакцинации. Тест может быть выполнен при наличии карантина в детском учреждении и др.
  6. Диагностика туберкулеза у пациентов со сниженным иммунитетом. С помощью теста можно выявить наличие микобактерий у ВИЧ-инфицированных и прочих больных, у которых наблюдаются проблемы с работой иммунной системы.

К недостаткам данного тестирования относятся:

  1. Низкая чувствительность. У 16% обследуемых инфицирование не выявляется. В некоторых научных работах этот процент достигает еще больших показателей. Это значит, что пациент, прошедший тестирование и получивший отрицательный результат, может быть направлен на дополнительное обследование.
  2. Положительный результат не дает возможности поставить точный диагноз. Пациента направляют на сдачу анализов на мокроту, рентген и др.
  3. Невозможность отличить носительство микобактерий от заболевания (активного или вылеченного). Наличие микобактерий не свидетельствует о том, что человек болен. Результат тестирования может оказаться положительным у человека, в организме которого заболевание не развивается. Такой пациент может быть признан потенциально больным. Ему назначат профилактическое лечение, что может привести к негативным последствиям.
  4. Возможность получения некорректных результатов из-за несоблюдения медицинским работником правил забора биоматериала.

Квантифероновый тест для диагностики туберкулеза проводится на коммерческой основе. В клиниках, где он выполняется, утверждают, что данный метод полностью заменяет кожные пробы с туберкулином. Но практикующие фтизиатры, опираясь на свой опыт работы с туберкулезными больными, не склонны верить этим утверждениям. По их отзывам, диагностика этого заболевания слишком сложна, и не один из существующих методов не дает 100% уверенности в их результатах.

Материал для исследования

В качестве материала для исследования выступает кровь, взятая из вены.

Подготовка к проведению

Перед сдачей крови ограничивать себя в чем-либо не надо, т. е. можно вести привычный образ жизни. Последний раз поесть можно за 8 часов до забора биоматериала, поэтому рекомендуется поужинать, а утром не завтракать и не пить газированную минеральную воду.

Как делают анализ

Для забора биологической жидкости используются 3 специальные пробирки – 2 для отрицательного и положительного контроля, а 3 для испытания. Медицинский сотрудник набирает в каждую по 1 мл крови. Пробирки закрываются крышками, которые входят в комплект. Лаборант встряхивает емкости несколько раз – кровь должна полностью покрыть стенки.

Провести исследование необходимо в течение 12-16 часов с момента забора. Емкости с кровью хранятся при комнатной температуре. Если в течение этого времени пробирки не доставлены в лабораторию, то ждать правильного результата гемотеста не стоит.

Оценка результатов

В полученных результатах присутствуют 3 параметра – концентрация гамма-интерферонов в положительном контроле (NIL), отрицательном контроле (Mitogen) и испытуемой пробе (TB Ag). Для верного интерпретирования следует учитывать все 3 показателя.

Читать еще:  Легкие человека картинки

Следующая таблица содержит пример результата квантиферонового теста:

Иммунодиагностика туберкулеза: Т-Спот и Квантифероновый тест

После первичного контакта с микобактериями туберкулеза (инфицирования) болезнь может перейти на следующу стадию и тогда разовьется латентная туберкулезная инфекция (ЛТИ).

ЛТИ — это еще не болезнь , но ее наличие — фактор повышенного риска развитие активной формы туберкулеза (болезни).

Внешне это совершенно здоровые люди!

По оценкам, у 10% иммунокомпетентных лиц с ЛТИ й в течение жизни развивается туберкулез.

  • Примерно у половины этих людей заболевание туберкулезом развивается в течение первых двух лет после заражения,
  • У второй половины туберкулез может развиться в течение жизни.

Риск прогрессирования от туберкулезной инфекции к туберкулезному заболеванию повышается у лиц с ослабленной иммунной системой.

Задача скрининга на туберкулез — вовремя выявить эти 10% людей, у которых произошел переход от простого инфицирования к ЛТИ и назначить им профилактическое лечение, чтобы не допустить перехода к стадии болезни. Около 2 миллиардов человек в мире имеют ЛТИ, но только у 10 млн в год есть риск заболеть туберкулезом.

Проба Манту в скрининге и диагностике

Если вы внимательно прочитали статью про пробу Манту , то знаете, что туберкулин, применяемый для проведения пробы Манту — это смесь множества антигенов человеческих (M. tuberculosis) и бычьих (M.bovis) микобактерий, а вакцина БЦЖ — это пра-пра-правнучка M.bovis.

Сложив вместе эти два факта мы получаем основной недостаток пробы Манту:

она хорошо справляется с задачей динамического скрининга, но хуже подходит для сиюминутной диагностики, т.к. может давать (+) реакцию у большинства привитых БЦЖ

В странах, где нет массовой вакцинации БЦЖ, пробой Манту пользоваться гораздо удобнее, не только как скрининговым методом, но и диагностическим . Но вот беда — именно там она не нужна массово, т.к. в этих странах совсем другой уровень заболеваемости туберкулезом и поголовный скрининг просто не нужен, только группам риска и то не везде. А там где массовый скрининг необходим (из-за высокой распространенности туберкулеза и высокого риска заражения) — всех прививают БЦЖ (ровно по той же причине). В этих странах продолжает оставаться актуальным вопрос дифференцирования постВакцинальной и постИнфекционной чувствительности к туберкулину.

Еще один недостаток пробы Манту состоит в том, что с ее помощью мы чаще всего не можем провести границу между инфицированием и латентной туберкулезной инфекцией (ЛТИ).

Новая страница в истории

В начале 2000-х появилась новая технология иммунодиагностики туберкулеза — Interferon-gamma release assays (IGRAs) — “тест высвобождения гамма-интерферона”.

Для проведения такого теста требуется забор крови из вены и ее исследование в лаборатории под воздействием микобактериальных антигенов. По сути, мы добиваемся такой же реакции, как при проведении пробы Манту, только вне организма и с некоторыми важными отличиями:

1. В отличие от туберкулина, применяемого для проведения ПМ, в IGRA-тестах для активации лимфоцитов применяют смесь из нескольких ВЫБОРОЧНЫХ антигенов (2 или 3 шт, в зависимости от теста). Эти антигены были выбраны потому, что они не встречаются в вакцинных штаммах БЦЖ и не свойственны большинству неТуберкулезных микобактерий, но присутствуют у возбудителя ТБ человека (M. tuberculosis) и других микобактериях “туберкулезного комплекса” (M.bovis, M.africanum, M.microti, M.canetti), потенциально патогенных для человека. 2. Еще одним важным отличием этих тестов от ПМ является то, что они выявляют реакции, присущие только лицам с наличием “активированного” инфекционного процесса начиная с ЛТИ, не затрагивая самую первую стадию — инфицирование. Представьте, что вы купили сим-карту и забыли про нее. Никто не знает, что она у вас есть. А если вы ее активировали и начали звонить с этого номера (не важно, один звонок был, или 1000), это уже можно отследить. Так же и тут.

Механизм работы IGRA-теста

✔️ В организме, в котором есть инфекционный ТБ процесс, вызванный M.tuberculosis, Т-лимфоциты под воздействием микобактериальных антигенов (МБА), специфических для этого возбудителя, начинают выделять гамма-интерферон (IFNγ).

✖️ В организме, где ТБ процесса нет, такой реакции НЕ БУДЕТ.

Эта методика не позволяет установить факт инфицирования . Только наличие “активированной” инфекции, начиная со стадии ЛТИ.

Чтобы эту реакцию “засечь”, нужно

  • — взять кровь пациента с жизнеспособными иммунными клетками
  • — выделить из нее лимфоциты
  • — добавить к ним МБА и оставить на какое-то время, чтобы произошла реакция
  • — посмотреть, начнут ли Т-лимфоциты выделять IFNγ

В России доступно 2 вида IGRA-тестов:

  • QuantiFERON [Квантиферон] — рег.в РФ в 2010
  • T-SPOT.TB [Т-спот] — рег.в РФ в 2012

Хотя они и основаны на одном принципе, но имеют отличия в методике детекци:

✔️ T-SPOT — проводится подсчет количества КЛЕТОК, которые выделяют IFNγ. Подсчет ведут по окрасившимся “отпечаткам” лимфоцитов на дне лунки, где происходила инкубация.

✔️ QuantiFERON — определяют количество (концентрацию) IFNγ в исследуемом образце.

Когда я готовила этот материал у меня сложился пазл! Эта разница в методах заложена прямо в их названиях! Отпечатки = пятна = spot. А “Т” — это “Т-лимфоцит”. То есть T-SPOT = буквально “отпечаток Т-лимфоцита”. QuantiFERON — от “Quanti” — “количество” и “FERON” — интерферон

Еще одним важным отличием является точка контакта клеток крови с антигенами:

T-SPOT.TB — Забор крови производится в обычную пробирку. Ее доставляют в лабораторию и уже там проводят инкубацию с МБА.

Читать еще:  Лекарства от кашля при беременности 3 триместр

QuantiFERON — при применении наборов последнего поколения (QuantiFERON Golg in Tube) pабор крови осуществляется в специальные пробирки (несколько штук), в которые УЖЕ содержат МБА, + пробирки с положительным и отрицательным контролем. Так что контакт с МБА начинается сразу.

Обратите внимание, что данные тесты не выявляют сами микобактерии как таковые, а только признаки их активности. А еще не дают ответа ГДЕ именно в организме (в легких, почках, кишечнике…), поэтому также как и кожные пробы должны оцениваться в комплексе с другими методами диагностики.

ПЛЮСЫ IGRA-тестов

➕ Высокая специфичность и отсутствие перекрестной реакции у привитых БЦЖ

➕ Более объективная оценка результатов (в сравнении с кожными пробами)

➕ Не нужен отдельный визит к врачу для оценки результата, как при кожной пробе

➕ Подходит для лиц с абсолютными противопоказаниями к проведению кожных проб

МИНУСЫ IGRA-тестов

➖ Требуется забор крови из вены Для маленьких детей это является серьезным лимитирующим фактором. Для квантиферонового теста крови нужно МНОГО (3-4 пробирки). Для Т-спота — меньше (одна пробирка). Например, если родители против прививок и кожных тестов, то им нужно 2 раза в год брать у ребенка кровь из вены начиная с 6-месячного возраста.

➖ Стоимость Это очень дорогие исследования, и не только в России. На сегодня Квантифероновый тест в СПб с забором материала — 6000р, Т-спот 8000р. Для массового скрининга могут применяться только в странах с очень высоким уровнем дохода.

➖ Логистика — Температура транспортировки и хранения. Как уже озвучила в описании методики, для выполнения анализа нужна кровь с живыми клетками! Нарушение температурного режима (+18- +25) может привести к тому, что материал будет испорчен и анализ недостоверен. Для Т-Спот это принципиально, тк контакт с антигенами происходит уже после транспортировки. Это может привести к ложно-отрицательному результату! — Образцы крови должны быть проанализированы через 8-24 часов после забора (для T-spot — 32 часа).

➖ Специальное лабораторное оборудование, обученный персонал. Для проведения кожных проб не требуется специального оборудования, манипуляция осуществляется медицинским персоналом. Для проведения IGRA-тестирования требуется гораздо больше. Поэтому в России существует всего порядка 50 лабораторий, которые могут самостоятельно их выполнять. В большинстве мест происходит только забор крови, а выполнение осуществляется по договору в другом месте, чаще в большой коммерческой профильной лаборатории в Москве.. Для родителя этот пункт не имеет большого значения, это, скорее, к вопросу доступности и соблюдения предыдущего пункта, если речь идет об удаленном от центра регионе.

Для стран с низким уровнем доходов рекомендации ВОЗ таковы:

“IGRA более дорогостоящий и технически сложный процесс, чем проба Манту. Учитывая сопоставимую производительность, но повышенную стоимость, замена пробы Манту на IGRA-тесты в качестве метода скрининга в условиях ограниченных ресурсов не рекомендуется. Коммерческие IGRA-тесты одобрены FDA как косвенные и дополнительные тесты на инфекцию ТБ в сочетании с оценкой риска, рентгенографией и другими медицинскими и диагностическими оценками. Существует несколько международных руководств по их использованию в странах с высоким уровнем дохода”. [1]

Что говорит по поводу IGRA-тестов Medscape?

▪️ Исследования, оценивающие показатели IGRA у детей, скудны.

▪️ Неопределенные результаты для детей являются потенциальным ограничением для внедрения IGRA в клиническую практику. Частота неопределенных результатов IGRA у детей различна (диапазон 0–17%), и большинство из них связаны с низким уровнем реакции на стимуляцию микобактериальными антигенами в результате недостаточной иммунологической зрелости. Неопределенные результаты анализа QFT-InTube чаще встречаются среди детей младшегоо́возраста.

▪️ Трудности в сборе крови для этих анализов и потребность в относительно большом объеме крови у маленьких детей (особенно у младенцев) также являются ограничениями. [2]

Из инструкции к набору Т-Спот

Эффективность теста T-SPOT.TB не была адекватно оценена с образцами от лиц моложе 17 лет, у беременных женщин и у пациентов с гемофилией [3]. А ведь как правило желание сделать не Манту, а такой тест есть у родителей МАЛЕНЬКИХ детей.

ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ

ОЧЕНЬ расстраивает информация из рунета, сильно искажающая сведения об этих тестах в позитивную сторону, и умалчивая о недостатках. Особенно бросается в глаза то, что у этих тестов якобы вообще нет противопоказаний и ничто не влияет на результаты теста. Как так? В организме влияет, а в пробирке не влияет? Клетки те же самые, только их достали. В западных источниках информация больше похожа на правду. CDC рекомендует соблюдать не менее 4-6 недель интервала между живыми инъекционными вакцинами (КПК, Ветряная оспа) и проведением этого теста. После перенесенной кори, краснухи, паротита и ветрянки, соответственно, тоже! Так что в случае плановой вакцинации живыми инъекционными вакцинами стОит делать забор крови до вакцинации либо в один день с прививкой.[3]

Квантифероновый тест — замена манту и диаскинтеста

В последние годы, наряду с пробой Манту, ВОЗ рекомендует использование Квантиферонового теста (QuantiFERON-TB Gold IT) для выявления больных туберкулезом. Квантифероновый тест – это современная альтернатива кожным тестам (манту, Диаскинтест), не имеющая противопоказаний и негативного влияния на организм, так как сам тест проводится вне организма: в пробирке с венозной кровью.

Квантифероновый тест на туберкулез

Квантифероновый тест для диагностики туберкулеза – это анализ крови на определение специфического гамма-интерферона, который выявляется только у инфицированных микобактерией туберкулеза. Для исследования берется венозная кровь утром строго натощак (или не менее чем через 8 часов после последнего приема пищи). Кровь исследуется в трёх специальных пробирках для исключения ложноотрицательного или ложноположительного результатов.

Читать еще:  Трясет и температура

Тест превосходит по чувствительности кожные пробы, дает точный ответ только у инфицированных бактериями туберкулеза (M.tuberculosis). У неинфицированных или прошедших БЦЖ-вакцинацию ответ будет отрицательным (т.е. не реагирует на БЦЖ).

Плюсы (преимущества) квантиферонового теста:

  • высокая специфичность (99%) и высокая чувствительность (89%);
  • отсутствие противопоказаний для исследования;
  • безопасность и отсутствие побочных реакций;
  • отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
  • интерпретация результатов теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых тестов.

Минусы (недостатки) квантиферонового теста:

  • не является законодательно закреплённым методом выявления туберкулеза, поэтому делается не бесплатно, а за «свой счёт»;
  • высокая стоимость квантиферонового теста (минимум в Москве – 1900 рублей, в среднем 3500 рублей);
  • тест возможно сделать пока только в крупных городах: Москве, Санкт-Петербурге, Новосибирске;
  • в 11% случаев тест дает ложноотрицательную реакцию (100% диагностики туберкулеза не существует);
  • тест не позволяет различить ЛТБИ (латентную туберкулёзную инфекцию) и активный туберкулёз.

Кому показан квантифероновый тест

Квантифероновый тест может быть использован вместо пробы Манту или Диаскинтеста во всех случаях, когда показано проведение кожных проб в качестве теста для диагностики туберкулеза. В качестве дополнительного метода исследования для подтверждения или опровержения сомнительных результатов кожных тестов. И особенно тест показан тем лицам, у которых имеются противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:

  • индивидуальная непереносимость туберкулина;
  • кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
  • дети, подростки и взрослые с высоким риском развития аллергической реакции;
  • инфекционные заболевания в период обострения;
  • васкулиты;
  • эпилепсия.

Положительный результат квантиферонового теста свидетельствует в пользу диагноза туберкулеза; однако, инфекции другими микобактериями (например, M. kansasii) могут быть причиной положительных результатов.

Диагностика туберкулезной инфекции методом T-SPOT

Информация об исследовании

T-SPOT.TB (тест Т-спот)

Непрямой метод лабораторной диагностики туберкулезной инфекции, основанный на определении количества гамма-интерферона (IFNg), который производят мононуклеарные лимфоциты периферической крови в результате взаимодействия с белками ESAT-6 и CFP-10 – их продуцирует бактерия-возбудитель заболевания. Позволяет идентифицировать возбудителя туберкулеза уже через три недели после инфицирования.

В 2017 году тест T-спот был включен в рекомендации Минздрава РФ в качестве скринингового диагностического метода для выявления туберкулезной инфекции у детей в возрасте от 1 года до 17 лет. Исследование не рекомендовано для дифференциации активной и латентной форм заболевания.

  • Подходит для скрининга туберкулезной инфекции у детей, прошедших иммунопрофилактику БЦЖ-вакциной.
  • Позволяет обнаружить иммунный ответ не только к наиболее распространенному возбудителю туберкулеза – M. tuberculosis, но и к значительно реже встречающимся видам M. microti, M. bovis, M. africanum, M. canetti.

Объем крови, необходимый для проведения исследования:

  • взрослые и дети старше 10 лет – 6–8 мл;
  • дети 2–9 лет – 4–6 мл;
  • пациенты с иммунодефицитом – не менее 10 мл.

Туберкулез

Инфекционное заболевание, поражающее легкие, вызывают бактерии рода Mycobacterium, в подавляющем большинстве случаев – M. tuberculosis. Ежегодно туберкулез уносит около 2 миллионов жизней. В год регистрируется более 9 миллионов новых случаев заболевания, а по подсчетам Всемирной организации здравоохранения, латентными носителями инфекции являются 2,3 миллиарда человек, то есть почти треть населения планеты.

Микобактерия туберкулеза – крупная неподвижная палочковидная бактерия. Один цикл ее деления длится 18–24 часа, по этой причине микобактерии медленно растут на питательных средах. При этом M. tuberculosis обладает высокой устойчивостью к факторам внешней среды: сохраняет жизнеспособность при нагревании до 80–90 о С и охлаждении до -260 о С, а также высушивании. На бытовых предметах способна сохраняться до полугода, выдерживает воздействие стандартных концентраций большинства дезинфицирующих средств, в агрессивной кислой среде (например, в желудочном соке) может сохраняться до 6 часов. Широко распространена генетическая устойчивость микобактерий к антибактериальным препаратам.

Пути передачи туберкулезной инфекции

  • Воздушно-капельный (основной): бактерия выделяется во внешнюю среду с капельками мокроты при выдохе или кашле.
  • Воздушно-пылевой: в результате накопления бактерий в пыли помещений, в которых длительное время находился больной человек.
  • Алиментарный: бактерии попадают в организм человека с молочными продуктами или мясом больных животных.
  • Контактный: при совместном использовании бытовых предметов, на которых способны накапливаться микобактерии (книги, гаджеты, постель, пледы, ковры).
  • Внутриутробный (крайне редкий): при поражении плаценты туберкулезом.

Возможные сценарии после инфицирования M. tuberculosis:

  1. Иммунная система самостоятельно избавляется от микобактерии.
  2. Развивается активная фаза заболевания.
  3. Бактерия длительное время сохраняется в латентной форме

Необходимо сдать анализ на туберкулез, если у вас есть следующие симптомы:

  • Кашель более 3 недель, иногда с мокротой и/или кровью.
  • Боль в груди.
  • Температура 37–38 ˚С
  • Ночная потливость, слабость.

Показания к назначению исследования

  • Скрининговое обследование детей (в качестве альтернативы пробе Манту или Диаскин-тесту).
  • При положительном результате пробы Манту у ребенка, прошедшего БЦЖ-вакцинацию.
  • В качестве дополнительного метода обследования пациентов при комплексной диагностике туберкулезной инфекции.

Подготовка к исследованию

Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 11 часов, натощак (между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8-ми часов, воду можно пить в обычном режиме), накануне исследования легкий ужин с ограничением приема жирной пищи.
За 1-2 часа до сдачи крови воздержаться от курения, не употреблять сок, чай, кофе, можно пить негазированную воду. Исключить физическое напряжение (бег, быстрый подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. За 15 минут до сдачи крови рекомендуется отдохнуть, успокоиться.

Результаты исследования

Интерпретация результата

Формат представления результатов – качественный. Оценивается количество спотов (специфически сенсибилизированных Т-лимфоцитов) по итогам инкубации с антигенами А (ЕSАТ-6) и B (СFР-10):

    отрицательный, если

Ссылка на основную публикацию
Статьи c упоминанием слов:
Adblock
detector