Квантифероновый тест в смоленске

Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза)

КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ (QuantiFERON®-ТВ Gold) – современный лабораторный тест для выявления туберкулезной инфекции, альтернатива классическому кожному тесту с туберкулином. В настоящий момент в различных странах разработано и выпущено большое число национальных рекомендаций по применению данного теста.

Квантифероновый тест основан на определении INF-γ (гамма-интерферона), высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими протеинами (ESAT-6, CFP-10, TB7.7 (p4)) микобактерий туберкулеза, входящих в комплекс Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. bovis, M. canettii, M. caprae, M. pinnipedii, M. mungi, M. microti, M. africanum и др.). Эти протеины отсутствуют в вакцинных штаммах M. bovis BCG и в большинстве нетуберкулезных микобактерий, за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum.

В исследуемой крови пациента (из пробирки с ТВ-антигеном) определяется содержание INFγ, результат анализируется в совокупности с данными, полученными из 2-х других пробирок (выполняющих роль контрольных).

Примерно 1/3 часть населения мира инфицирована МБТ, и только у 5-10% инфицированных лиц развивается заболевание. При наличии неблагоприятных факторов латентная туберкулезаня инфекция (ЛТИ – состояние, когда микобактерии туберкулеза (МБТ) присутствуют в организме человека, но при этом отсутствуют клинические и рентгенологические признаки туберкулеза) может перейти в активную форму с развитием внелегочного туберкулеза (например, туберкулез почек).

К группе высокого риска инфицирования МБТ относятся лица, имевшие контакт с больным туберкулезом, или имеющие высокую вероятность контакта (работники противотуберкулезных диспансеров, приютов, исправительных учреждений и др.), а также лица с сопутствующими заболеваниями (ВИЧ-инфекцией, сахарным диабетом и др.).

Используемые для диагностики ЛТИ кожные тесты – проба Манту и Диаскинтест®, имеют ряд противопоказаний и ограничений к применению.

Противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:

• Индивидуальная непереносимость туберкулина;
• Острые и хронические инфекционные заболевания и соматические заболевания в период обострения;
• Кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
• Период карантина в детских коллективах.

У пациентов с индивидуальной гиперчувствительностью к туберкулину может наблюдаться ложноположительная реакция.

Сравнение тестов для диагностики туберкулезной инфекции

Квантифероновый тест — отзыв

Достойная альтернатива Манту и Диаскинтест

Расскажу нашу историю:

В конце января 2019 года дочке (2 года) сделали Манту. Никто тогда не обратил внимания, что вираж между первой Манту (в 1 год) и второй был 6 мм, и педиатр с медсестрой преспокойненько отправили нас на прививку.

Пришло время идти в сад, и сейчас, спустя полгода после Манту, мы благополучно обошли всех врачей, сдали все нужные анализы и пошли к заведующей поликлиники подписывать медицинскую карту. Тут-то и всплыл тот факт, что педиатр с медсестрой направили нас в процедурный на прививку вместо того, чтобы направить к фтизиатру! Сказать, что я была в шоке, — ничего не сказать.

Заведующая спокойно так сказала: «Сходите к фтизиатру, поставьте Диаскинтест». Я отказалась, на что она ответила: «Никто вас не принудит делать Диаскинтест. Возьмите флюорографии всех членов семьи, если есть рентгеновский снимок ребёнка, то тоже возьмите обязательно, ведь часто фтизиатры только на основании здорового рентгена пишут справку о допуске в сад».

Порыскав на просторах интернета, нашла много информации по этой теме. Оказывается, законодательством не отрегулирован вопрос о детях, не обследовавшихся на предмет туберкулеза. Да, ты имеешь право на отказ от Манту, но СанПин гласит о невозможности приема такого ребёнка в сад/школу!

В итоге все пути ведут в тубдиспансер, где тоже кто во что горазд: кто-то довольствуется флюрой родителей, рентгеном и ПЦР, а кто-то гонит на дорогие тесты (наш случай).

В итоге родители стоят перед выбором: делать Манту/Диаскинтест, либо проводить альтернативные Т-SPOT или квантифероновый тест, либо. сидеть дома. Заставлять делать рентген вашему ребёнку тоже никто не имеет права, и, как оказалось в нашем случае, у нас рентгеновский снимок фтизиатр категорически отказался принимать, ссылаясь на то, что туберкулёз бывает разный, не только легких. Снимок у нас был, делали ещё в феврале, чтобы исключить пневмонию (сильно заболели после Манту и живой вакцины полиомиелита — совпадение ли? Не думаю). «Но как же так, ведь в сад по закону не могут принять только детей с легочной формой туберкулёза?!» — вопрошаю я у противной фтизиатрихи, на что она профессионально отмалчивается. Естественно, что я задала вопрос об альтернативных методах исследования, и она заговорила о них.

Окей, сказали мы и помахали тетке рукой. Придя домой, я начала читать о T-SPOT и квантифероновом тесте, с целью понять, что это за фрукты и с чем их едят. Оказывается, в обоих случаях это высокочувствительные (99% точности) виды диагностики, проводимые In Vitro, то есть вне организма тестируемого. Для обоих методов проводится забор крови из вены в пробирки со специальными реагентами, и потом все это дело исследуется на предмет латентного/активного туберкулёза. В общем, принцип один и тот же — забор венозной крови.

Сравнив цены по городу, мы решили сделать квантифероновый тест в одной широко известной лаборатории, так как сейчас как раз на него проходит акция (3990₽ вместо 5990₽). Пришли, спокойно сдали кровь из вены и ушли. Результат обещали прислать на почту через 3-10 календарных дней.

Наш результат был готов уже через 5 календарных дней:

А что делать людям из маленьких городов, где не проводится такая диагностика? Что делать семьям, чей бюджет не позволяет пользоваться платными услугами? Ответа нет. И это очень грустно. Грустно и обидно за нашу страну.

Преимуществ у квантиферонового теста много:

🧪 Не даёт ложноположительных и ложноотрицательных результатов;

🧪 Не реагирует на БЦЖ, в отличие от Манту и Диаскина;

🧪 Показан аллергикам и астматикам;

🧪 Является «золотым стандартом» диагностики туберкулеза в Европе и по всему миру;

🧪 Выявляет любые формы туберкулеза.

Да, квантифероновый тест — удовольствие дорогое. Но за это я не могу снизить ему оценку, ибо здесь мы оцениваем именно качество услуги. Так что ставлю ему твёрдую 5 и рекомендую как безопасный современный метод диагностики туберкулеза.

Квантифероновый тест — замена манту и диаскинтеста

В последние годы, наряду с пробой Манту, ВОЗ рекомендует использование Квантиферонового теста (QuantiFERON-TB Gold IT) для выявления больных туберкулезом. Квантифероновый тест – это современная альтернатива кожным тестам (манту, Диаскинтест), не имеющая противопоказаний и негативного влияния на организм, так как сам тест проводится вне организма: в пробирке с венозной кровью.

Квантифероновый тест на туберкулез

Квантифероновый тест для диагностики туберкулеза – это анализ крови на определение специфического гамма-интерферона, который выявляется только у инфицированных микобактерией туберкулеза. Для исследования берется венозная кровь утром строго натощак (или не менее чем через 8 часов после последнего приема пищи). Кровь исследуется в трёх специальных пробирках для исключения ложноотрицательного или ложноположительного результатов.

Тест превосходит по чувствительности кожные пробы, дает точный ответ только у инфицированных бактериями туберкулеза (M.tuberculosis). У неинфицированных или прошедших БЦЖ-вакцинацию ответ будет отрицательным (т.е. не реагирует на БЦЖ).

Плюсы (преимущества) квантиферонового теста:

• высокая специфичность (99%) и высокая чувствительность (89%);
• отсутствие противопоказаний для исследования;
• безопасность и отсутствие побочных реакций;
• отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
• интерпретация результатов теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых тестов.

Минусы (недостатки) квантиферонового теста:

• не является законодательно закреплённым методом выявления туберкулеза, поэтому делается не бесплатно, а за «свой счёт»;
• высокая стоимость квантиферонового теста (минимум в Москве – 1900 рублей, в среднем 3500 рублей);
• тест возможно сделать пока только в крупных городах: Москве, Санкт-Петербурге, Новосибирске;
• в 11% случаев тест дает ложноотрицательную реакцию (100% диагностики туберкулеза не существует);
• тест не позволяет различить ЛТБИ (латентную туберкулёзную инфекцию) и активный туберкулёз.

Кому показан квантифероновый тест

Квантифероновый тест может быть использован вместо пробы Манту или Диаскинтеста во всех случаях, когда показано проведение кожных проб в качестве теста для диагностики туберкулеза. В качестве дополнительного метода исследования для подтверждения или опровержения сомнительных результатов кожных тестов. И особенно тест показан тем лицам, у которых имеются противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:

• индивидуальная непереносимость туберкулина;
• кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
• дети, подростки и взрослые с высоким риском развития аллергической реакции;
• инфекционные заболевания в период обострения;
• васкулиты;
• эпилепсия.

Положительный результат квантиферонового теста свидетельствует в пользу диагноза туберкулеза; однако, инфекции другими микобактериями (например, M. kansasii) могут быть причиной положительных результатов.

Иммунодиагностика туберкулеза: Т-Спот и Квантифероновый тест

После первичного контакта с микобактериями туберкулеза (инфицирования) болезнь может перейти на следующу стадию и тогда разовьется латентная туберкулезная инфекция (ЛТИ).

ЛТИ — это еще не болезнь , но ее наличие — фактор повышенного риска развитие активной формы туберкулеза (болезни).

Внешне это совершенно здоровые люди!

По оценкам, у 10% иммунокомпетентных лиц с ЛТИ й в течение жизни развивается туберкулез.

• Примерно у половины этих людей заболевание туберкулезом развивается в течение первых двух лет после заражения,
• У второй половины туберкулез может развиться в течение жизни.

Риск прогрессирования от туберкулезной инфекции к туберкулезному заболеванию повышается у лиц с ослабленной иммунной системой.

Задача скрининга на туберкулез — вовремя выявить эти 10% людей, у которых произошел переход от простого инфицирования к ЛТИ и назначить им профилактическое лечение, чтобы не допустить перехода к стадии болезни. Около 2 миллиардов человек в мире имеют ЛТИ, но только у 10 млн в год есть риск заболеть туберкулезом.

Проба Манту в скрининге и диагностике

Если вы внимательно прочитали статью про пробу Манту , то знаете, что туберкулин, применяемый для проведения пробы Манту — это смесь множества антигенов человеческих (M. tuberculosis) и бычьих (M.bovis) микобактерий, а вакцина БЦЖ — это пра-пра-правнучка M.bovis.

Сложив вместе эти два факта мы получаем основной недостаток пробы Манту:

она хорошо справляется с задачей динамического скрининга, но хуже подходит для сиюминутной диагностики, т.к. может давать (+) реакцию у большинства привитых БЦЖ

В странах, где нет массовой вакцинации БЦЖ, пробой Манту пользоваться гораздо удобнее, не только как скрининговым методом, но и диагностическим . Но вот беда — именно там она не нужна массово, т.к. в этих странах совсем другой уровень заболеваемости туберкулезом и поголовный скрининг просто не нужен, только группам риска и то не везде. А там где массовый скрининг необходим (из-за высокой распространенности туберкулеза и высокого риска заражения) — всех прививают БЦЖ (ровно по той же причине). В этих странах продолжает оставаться актуальным вопрос дифференцирования постВакцинальной и постИнфекционной чувствительности к туберкулину.

Еще один недостаток пробы Манту состоит в том, что с ее помощью мы чаще всего не можем провести границу между инфицированием и латентной туберкулезной инфекцией (ЛТИ).

Новая страница в истории

В начале 2000-х появилась новая технология иммунодиагностики туберкулеза — Interferon-gamma release assays (IGRAs) — “тест высвобождения гамма-интерферона”.

Для проведения такого теста требуется забор крови из вены и ее исследование в лаборатории под воздействием микобактериальных антигенов. По сути, мы добиваемся такой же реакции, как при проведении пробы Манту, только вне организма и с некоторыми важными отличиями:

1. В отличие от туберкулина, применяемого для проведения ПМ, в IGRA-тестах для активации лимфоцитов применяют смесь из нескольких ВЫБОРОЧНЫХ антигенов (2 или 3 шт, в зависимости от теста). Эти антигены были выбраны потому, что они не встречаются в вакцинных штаммах БЦЖ и не свойственны большинству неТуберкулезных микобактерий, но присутствуют у возбудителя ТБ человека (M. tuberculosis) и других микобактериях “туберкулезного комплекса” (M.bovis, M.africanum, M.microti, M.canetti), потенциально патогенных для человека. 2. Еще одним важным отличием этих тестов от ПМ является то, что они выявляют реакции, присущие только лицам с наличием “активированного” инфекционного процесса начиная с ЛТИ, не затрагивая самую первую стадию — инфицирование. Представьте, что вы купили сим-карту и забыли про нее. Никто не знает, что она у вас есть. А если вы ее активировали и начали звонить с этого номера (не важно, один звонок был, или 1000), это уже можно отследить. Так же и тут.

Механизм работы IGRA-теста

✔️ В организме, в котором есть инфекционный ТБ процесс, вызванный M.tuberculosis, Т-лимфоциты под воздействием микобактериальных антигенов (МБА), специфических для этого возбудителя, начинают выделять гамма-интерферон (IFNγ).

✖️ В организме, где ТБ процесса нет, такой реакции НЕ БУДЕТ.

Эта методика не позволяет установить факт инфицирования . Только наличие “активированной” инфекции, начиная со стадии ЛТИ.

Чтобы эту реакцию “засечь”, нужно

• — взять кровь пациента с жизнеспособными иммунными клетками
• — выделить из нее лимфоциты
• — добавить к ним МБА и оставить на какое-то время, чтобы произошла реакция
• — посмотреть, начнут ли Т-лимфоциты выделять IFNγ

В России доступно 2 вида IGRA-тестов:

• QuantiFERON [Квантиферон] — рег.в РФ в 2010
• T-SPOT.TB [Т-спот] — рег.в РФ в 2012

Хотя они и основаны на одном принципе, но имеют отличия в методике детекци:

✔️ T-SPOT — проводится подсчет количества КЛЕТОК, которые выделяют IFNγ. Подсчет ведут по окрасившимся “отпечаткам” лимфоцитов на дне лунки, где происходила инкубация.

✔️ QuantiFERON — определяют количество (концентрацию) IFNγ в исследуемом образце.

Когда я готовила этот материал у меня сложился пазл! Эта разница в методах заложена прямо в их названиях! Отпечатки = пятна = spot. А “Т” — это “Т-лимфоцит”. То есть T-SPOT = буквально “отпечаток Т-лимфоцита”. QuantiFERON — от “Quanti” — “количество” и “FERON” — интерферон

Еще одним важным отличием является точка контакта клеток крови с антигенами:

T-SPOT.TB — Забор крови производится в обычную пробирку. Ее доставляют в лабораторию и уже там проводят инкубацию с МБА.

QuantiFERON — при применении наборов последнего поколения (QuantiFERON Golg in Tube) pабор крови осуществляется в специальные пробирки (несколько штук), в которые УЖЕ содержат МБА, + пробирки с положительным и отрицательным контролем. Так что контакт с МБА начинается сразу.

Обратите внимание, что данные тесты не выявляют сами микобактерии как таковые, а только признаки их активности. А еще не дают ответа ГДЕ именно в организме (в легких, почках, кишечнике…), поэтому также как и кожные пробы должны оцениваться в комплексе с другими методами диагностики.

ПЛЮСЫ IGRA-тестов

➕ Высокая специфичность и отсутствие перекрестной реакции у привитых БЦЖ

➕ Более объективная оценка результатов (в сравнении с кожными пробами)

➕ Не нужен отдельный визит к врачу для оценки результата, как при кожной пробе

➕ Подходит для лиц с абсолютными противопоказаниями к проведению кожных проб

МИНУСЫ IGRA-тестов

➖ Требуется забор крови из вены Для маленьких детей это является серьезным лимитирующим фактором. Для квантиферонового теста крови нужно МНОГО (3-4 пробирки). Для Т-спота — меньше (одна пробирка). Например, если родители против прививок и кожных тестов, то им нужно 2 раза в год брать у ребенка кровь из вены начиная с 6-месячного возраста.

➖ Стоимость Это очень дорогие исследования, и не только в России. На сегодня Квантифероновый тест в СПб с забором материала — 6000р, Т-спот 8000р. Для массового скрининга могут применяться только в странах с очень высоким уровнем дохода.

➖ Логистика — Температура транспортировки и хранения. Как уже озвучила в описании методики, для выполнения анализа нужна кровь с живыми клетками! Нарушение температурного режима (+18- +25) может привести к тому, что материал будет испорчен и анализ недостоверен. Для Т-Спот это принципиально, тк контакт с антигенами происходит уже после транспортировки. Это может привести к ложно-отрицательному результату! — Образцы крови должны быть проанализированы через 8-24 часов после забора (для T-spot — 32 часа).

➖ Специальное лабораторное оборудование, обученный персонал. Для проведения кожных проб не требуется специального оборудования, манипуляция осуществляется медицинским персоналом. Для проведения IGRA-тестирования требуется гораздо больше. Поэтому в России существует всего порядка 50 лабораторий, которые могут самостоятельно их выполнять. В большинстве мест происходит только забор крови, а выполнение осуществляется по договору в другом месте, чаще в большой коммерческой профильной лаборатории в Москве.. Для родителя этот пункт не имеет большого значения, это, скорее, к вопросу доступности и соблюдения предыдущего пункта, если речь идет об удаленном от центра регионе.

Для стран с низким уровнем доходов рекомендации ВОЗ таковы:

“IGRA более дорогостоящий и технически сложный процесс, чем проба Манту. Учитывая сопоставимую производительность, но повышенную стоимость, замена пробы Манту на IGRA-тесты в качестве метода скрининга в условиях ограниченных ресурсов не рекомендуется. Коммерческие IGRA-тесты одобрены FDA как косвенные и дополнительные тесты на инфекцию ТБ в сочетании с оценкой риска, рентгенографией и другими медицинскими и диагностическими оценками. Существует несколько международных руководств по их использованию в странах с высоким уровнем дохода”. [1]

Что говорит по поводу IGRA-тестов Medscape?

▪️ Исследования, оценивающие показатели IGRA у детей, скудны.

▪️ Неопределенные результаты для детей являются потенциальным ограничением для внедрения IGRA в клиническую практику. Частота неопределенных результатов IGRA у детей различна (диапазон 0–17%), и большинство из них связаны с низким уровнем реакции на стимуляцию микобактериальными антигенами в результате недостаточной иммунологической зрелости. Неопределенные результаты анализа QFT-InTube чаще встречаются среди детей младшегоо́возраста.

▪️ Трудности в сборе крови для этих анализов и потребность в относительно большом объеме крови у маленьких детей (особенно у младенцев) также являются ограничениями. [2]

Из инструкции к набору Т-Спот

Эффективность теста T-SPOT.TB не была адекватно оценена с образцами от лиц моложе 17 лет, у беременных женщин и у пациентов с гемофилией [3]. А ведь как правило желание сделать не Манту, а такой тест есть у родителей МАЛЕНЬКИХ детей.

ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ

ОЧЕНЬ расстраивает информация из рунета, сильно искажающая сведения об этих тестах в позитивную сторону, и умалчивая о недостатках. Особенно бросается в глаза то, что у этих тестов якобы вообще нет противопоказаний и ничто не влияет на результаты теста. Как так? В организме влияет, а в пробирке не влияет? Клетки те же самые, только их достали. В западных источниках информация больше похожа на правду. CDC рекомендует соблюдать не менее 4-6 недель интервала между живыми инъекционными вакцинами (КПК, Ветряная оспа) и проведением этого теста. После перенесенной кори, краснухи, паротита и ветрянки, соответственно, тоже! Так что в случае плановой вакцинации живыми инъекционными вакцинами стОит делать забор крови до вакцинации либо в один день с прививкой.[3]